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快速內切酶SmaI
產品簡介

快速內切酶SmaI快速內切酶經(jīng)過基因工程重組、能夠在5~15分鐘內精確完成DNA切割的高保真限制性內切酶,適用于質粒DNA、PCR產物或基因組DNA等的快速酶切。快速內切酶具有如下特點:5~15分鐘內即可完成酶切;共用一種酶切Buffer,大大簡化酶切反應體系;良好的酶活冗余度,輕松應對底物過量或困難模板酶切。

產品型號:
更新時間:2022-08-20
廠商性質:代理商
訪問量:321
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品牌其他品牌貨號F5572S
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快速內切酶SmaI


產品貨號F5572S

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注:37℃反應時酶活性會略降低,需適當延長溫育時間。

產品組成

組分

規(guī)格

LabFD™ SmaI

100ul

10×LabFD™ Buffer

1ml

10×LabFD™ Color Buffer

1ml


產品簡介

LabFD™快速內切酶是一系列經(jīng)過基因工程重組、能夠在5~15分鐘內精確完成DNA切割的高保真限制性內切酶,適用于質粒DNA、PCR產物或基因組DNA等的快速酶切。LabFD™快速內切酶具有如下特點:5~15分鐘內即可完成酶切;共用一種酶切Buffer,大大簡化酶切反應體系;良好的酶活冗余度,輕松應對底物過量或困難模板酶切。此外,LABLEAD去磷酸化、連接試劑在LabFD™酶切Buffer中具有baifenzhi100活性,支持一管化反應,提升“酶切-修飾-連接"的體驗。

建議反應條件

LabFD™緩沖液;

25℃溫育;

參照“DNA快速酶切流程"配制反應體系。

失活條件

80℃溫育 20 min

質量控制

功能活性檢測

最shi反應溫度下,在20ul反應體系中,1ul LabFD™ SmaI能夠在15min內*消化1ugλDNA (HindIII digest)。

超長時間溫育檢測

最shi反應溫度下,將1ul LabFD™ SmaI與1ugλDNA (HindIII digest)共同溫育3h,未檢測到其他核酸酶污染或星號活性引起的底物非特異性降解,延時酶切可能出現(xiàn)星號活性。

酶切-連接-再酶切檢測

最shi反應溫度下,使用1ul LabFD™  SmaI消化底物,回收酶切產物。在22℃下使用適量Fast T4 DNA Ligase可以將酶切產物重新連接。將連接產物再次回收后,使用相同的內切酶可以重新切開連接產物。

非特異性內切酶活性檢測

最shi反應溫度下,將1ul LabFD™  SmaI與1ug超螺旋質粒DNA共同溫育4h,使用瓊脂糖凝膠電泳檢測,質粒DNA仍然處于超螺旋狀態(tài)。

藍白斑檢測

將含有單一lacZα基因的載體以1ul LabFD™  SmaI消化,重新連接后轉化入大腸桿菌感受態(tài)細胞,涂布在含有對應抗生素、IPTG和X-gal的LB培養(yǎng)基平板上。連接正確的產物會生長出藍色菌落,而連接錯誤(即DNA末端切口不完整)的產物將得到白色菌落。對于LabFD™系列限制酶而言,白色菌落比例應小于1%。

 

 

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